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一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(绿荧光)

更新时间:2020-08-13

简要描述:

细胞凋亡(Apoptosis)的一个显著特点是细胞染色体DNA的降解,在一些内源性核酸内切酶的作用下,核小体间的DNA被切断,从而产生不同长度的寡聚核小体片段,表现为琼脂糖凝胶电泳中呈现特异的180-200 bp DNA Ladder图谱,而坏死细胞的DNA呈弥漫的连续图谱。
美仑一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(One Step TUNEL Apoptosis Assay Kit)

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一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(绿荧光)产品描述

细胞凋亡(Apoptosis)的一个特点是细胞染色体DNA的降解,在一些内源性核酸内切酶的作用下,核小体间的DNA被切断,从而产生不同长度的寡聚核小体片段,表现为琼脂糖凝胶电泳中呈现特异的180-200 bp DNA Ladder图谱,而坏死细胞的DNA呈弥漫的连续图谱。

美仑一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(One Step TUNEL Apoptosis Assay Kit)采用TUNEL(TdT-mediated dUTP Nick End Labeling)方法,其原理为:末端脱氧核糖核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT)在凋亡细胞断裂DNA的3´-羟基(3´-OH)末端催化掺入荧光素-12-脱氧三磷酸尿苷(FITC-12-dUTP)。FITC-12-dUTP标记的DNA可以用荧光显微镜直接观察或者用流式细胞仪定量检测。以50μl加样量为标准,本试剂盒可测定20次。

一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(绿荧光)产品优势

使用方便快捷,对于经过固定和洗涤的组织样本(石蜡切片、冰冻切片)和细胞样本(贴壁细胞、悬浮细胞),只需经过一步染色,洗涤后便可以进行凋亡检测。

★  本试剂盒还提供了DNase I阳性对照和Proteinase K,以便操作。

★  灵敏度好、特异性好、检测效果好。

对照实验:采用某国内知名品牌TUNEL检测试剂盒作为对照,在相同的实验条件下,用Apoptosis Activator 2处理C6细胞,荧光显微镜观察细胞凋亡后的荧光染色状况。

检测结果:美仑一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒灵敏度高,染色效果更好。

 

保存条件

-20℃避光保存,有效期一年。

 

操作方法

请参考说明书。

注意事项

1.配制TUNEL检测液之后的步骤注意避光操作。

2.若配制TUNEL检测液操作时间较长,请将TdT Enzyme (10×)、FITC-12-dUTP Labeling Mix和配好的检测液置于冰上暂时保存。

3.需自备PBS或HBSS,抗荧光衰减封片剂(美仑货号:MA0221或MA0222),组织固定液(美仑货号:MA0192)或4%多聚甲醛,Triton X-100,二甲苯,无水乙醇等。

4.PBS或HBSS清洗后,为了各种反应的有效进行,请尽量除去PBS或HBSS溶液后再进行下一步反应。

5.结果分析时注意:在坏死的晚期阶段或在高度增殖/代谢的组织细胞中可产生大量DNA,从而引起假阳性结果;而有些类型的凋亡性细胞死亡缺乏DNA断裂或DNA裂解不完全,以及细胞外的矩阵成分阻止TdT进入胞内反应,进而产生假阴性结果。

6.为了您的安全和健康,操作时请穿着实验服并佩戴一次性手套。

本产品仅用于科研

 

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